只因不小心被一只受过放射性感染的蜘蛛咬伤，平凡瘦弱的高中生彼得·本杰明·帕克（尼尔·帕特里克·哈里斯 Neil Patrick Harris 饰）的人生便发生了翻天覆地的变化。从此以后，他穿上红蓝相间的紧身服，戴上面具，凭借发射出的蜘蛛丝穿梭在喧哗闹市的每一个角落。“能力越大，责任越大”，彼得以蜘蛛侠的身份，和破坏城市及世界和平的恶势力作斗争。全新的征程，更强大的敌人，女武士鹿田、The Talon、电王（Ethan Embry 配音）、蜥蜴人（罗布·赞比 Rob Zombie 配音）、银貂（Virginia Madsen 配音）等可怕对手相继登场。蜘蛛侠从不退却，勇敢地迎上前去……本片为采用3D技术制作的新版动画。
演员：亚美莉卡·杨 Cassidy Naber Kirsten Day Cassandra Morris Lisa Fuson 瑞提什·拉詹 格雷格·秦 Cristina Milizia
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演员：埃尔希·洛夫洛克 迈克尔·科瓦赫 Nola Klop Shara Kirby Hayley Nelson Luke Lerdwichagul 大卫·迪克森 Jasmine Yang Kevin Lerdwichagul Sean Chiplock Liam Vickers
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演员：克莱斯·威廉斯 阿尼卡·诺尼·罗斯 加里·安东尼·威廉斯 帕特里夏·贝尔彻 林恩·惠特菲尔德 艾萨克·罗宾逊-史密斯 史蒂夫·图森特 乔娜·肖 温妮·哈洛 泽克·阿尔顿 雅克·考利蒙 Larry Herron Adam Gold 丹娜·奎里拉 沃尔斯·哈蒙德 艾丹·布里斯托 Gabriel Burrafato
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